Générateur de cavitation reproductible : exemples d'application biologique in vitro

• Auteur :

  MESTAS J-L, EL-MAALOUF J., INSERRA C.,GILLES B., BERA J-C, RESLAN L., DUMONTET C.

• Auteur moral :

• Année de parution :

  2010

• Résumé :

  La cavitation ultrasonore peut conduire à différents types d’effets biologiques en fonction de son intensité. Ces effets, très destructeurs, présents en lithotritie, en hyperthermie par HIFU ou en histotritie, peuvent aussi réaliser, pour des intensités moindres, des pores cellulaires de taille suffisante pour permettre l’entrée de particules, de matériels génétiques ou de produits chimiques. Dans ces dernières applications, la cavitation n’apparaît pas systématiquement et les expérimentations nécessitent souvent des adjuvants comme les produits de contraste utilisés comme germes de cavitation. Nous avons développé un générateur continu de cavitation, travaillant dans la plage d’intensité acoustique de 0,2 à 3,5 W/cm2, et régulé (cadencement : 5 ms) sur un indice de cavitation (CI) établi à partir du signal acoustique émis par la cavitation. Ce dispositif, grâce à la reproductibilité du processus de cavitation générée, a permis de caractériser en sonodynamothérapie les effets potentialisateurs d’un photosensibilisant (Photofrin©) et de transfecter des cellules non-adhérentes (RL du lymphome folliculaire ou LLC de Leucémie Lymphoïde Chronique) très difficiles à transfecter par ailleurs (électroporation, lipofection). Le Photofrin©, additionné au milieu de culture (incubation de 30 min), potentialise l’effet cytotoxique induit par la cavitation, de sa phase stable à transitoire, avec une liaison très forte avec le CI (r2>0,95). Nos travaux ont montré une plus grande sensibilité, induite par le Photofrin©, des membranes cellulaires aux contraintes mécaniques. Dans l’étude du dysfonctionnement des mécanismes régulateurs de l’apoptose des LLC par le ciblage des gènes responsables de la chimiorésistance, la transfection de siARNs correspondants a pu être réalisée. Les taux de transfection sont reproductibles, de 10% pour le plasmide pEGFP à près de 30% pour un siARN (BCL2L1), avec une mortalité résiduelle réduite à 20%. Ce dispositif a aussi permis d’élaborer un modèle de tumeur fluorescent, par une transfection «stable» de plasmides, pour des études de tumorogénèse.

• ISBN :

• Thématique(s) :

  Équipements, technologies et recherche

• Type de contenu :

  Article scientifique

• Mot(s) clé(s) :

• Langue :

  Français

• Disponible en prêt au CidB :

  Oui

• Réf. CidB :

  78/13209

• Lien de téléchargement :

  https://www.bruit.fr/revues/78_13209.PDF